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諾氟沙星含量測(cè)定

點(diǎn)擊次數(shù):5324 發(fā)布時(shí)間:2012-03-30

 

一、實(shí)驗(yàn)方法
Cometro液相色譜系統(tǒng);
紫外檢測(cè)器波長(zhǎng):278nm;
Kromasil C18 250*4.6mm 5u 色譜柱;
柱溫:25;
流動(dòng)相:0.025mol/L磷酸溶液(用三乙胺調(diào)pH=3.0):乙腈=87:13;
流速:1.00ml/min;
諾氟沙星對(duì)照品-0.15mg/ml,樣品;
進(jìn)樣量:對(duì)照品分別進(jìn)樣5ul,7.5ul,10ul,12.5ul,15ul3次,樣品進(jìn)樣10ul,使樣品與標(biāo)準(zhǔn)品1:1混合再進(jìn)樣10ul,考察線性相關(guān)性,保留時(shí)間重現(xiàn)性,回收率。
二、譜圖結(jié)果
 
 

 

 
附進(jìn)樣量,保留時(shí)間,峰面積關(guān)系表:

進(jìn)樣量
保留時(shí)間/min
峰面積/103
標(biāo)準(zhǔn)品5ul
10.533
728.12
標(biāo)準(zhǔn)品7.5ul
10.541
979.1
標(biāo)準(zhǔn)品10ul
10.528
1230.741
標(biāo)準(zhǔn)品12.5ul
10.524
1460.44
標(biāo)準(zhǔn)品15ul
10.401
1732.42
樣品10ul
10.517
1029.987
樣品標(biāo)準(zhǔn)品11混合10ul
10.213
1120.78

 
三、結(jié)果運(yùn)算
1、保留時(shí)間重現(xiàn)性考察:

保留時(shí)間
10.533
10.541
10.528
10.524
10.401
RSD
0.5588%
             

 
2、線性相關(guān)性考察及樣品含量計(jì)算:
以標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)樣量為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo),得線性方程:

 
由此可算出樣品中諾氟沙星含量0.1205mg/ml
3、回收率考察:
根據(jù)上面線性方程可算出混合后樣品含諾氟沙星0.1342mg/ml,而實(shí)際真值是0.1352mg/ml,因此得回收率為99.20%。
四、綜述
1、此三項(xiàng)考察綜合考察了Cometro 6000 PVW UV/VIS檢測(cè)器的吸收穩(wěn)定性,Cometro 6000 LDI泵的流量性,進(jìn)樣伐、進(jìn)樣針的性,Kromasil色譜柱的性。
2、本實(shí)驗(yàn)流動(dòng)相中三乙胺看似作用是調(diào)節(jié)pH,其實(shí)際zui大作用是調(diào)整峰型,因?yàn)橹Z氟沙星有含氮性基團(tuán),在酸性環(huán)境中容易與色譜柱中的硅羥基產(chǎn)生靜電作用而拖尾,如下圖:
而三乙胺可以代替物質(zhì)與硅羥基作用,了物質(zhì)的峰型。因此調(diào)節(jié)pH時(shí)候得注意三乙胺的加入量,不能過(guò)少,可以直接加入適量三乙胺,再用磷酸調(diào)節(jié)pH。

 

 

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